Terapia Génica en Diabetes Mellitus

1. Tema: Terapia génica en Diabetes
2. Tipo de terapia génica: In vivo. Células somáticas.
3. Gen receptor: PDX-1 y GLUT2
4. Vector: virales: retrovirus y adenovirus-asociados; y no virales
5. Vía de administración: parenteral y por inhalación.
6. Resultados:

• Incrementar la captación de glucosa periférica en el músculo y el tejido adiposo y disminuir la liberación de glucosa hepática. 
• Mejorar el control de glucosa en sangre y evitar los problemas que se originan a largo plazo en los pacientes con diabetes.

Terapia Génica en Diabetes

Terapia con Stem Cells en Diabetes Mellitus

La terapia con células madre adiposas es un tratamiento alternativo para ayudar a manejar las complicaciones de la diabetes. Las células madre pueden tener el potencial de reemplazar innumerables células del cuerpo, incluidas las células productoras de insulina. Estas células pueden ayudar en la rehabilitación del cuerpo mediante la sustitución de células enfermas así como revertir la incapacidad de producir una respuesta favorable del sistema inmunológico mediante la regeneración de nuevas células saludables.
Las células madre adultas se obtienen del Banco ITC de tejido del donante o se recogen del tejido adiposo del propio paciente, un proceso que tarda 21 días para cultivar, diferenciar y administrarlas al paciente.

1. Un tratamiento típico es el siguiente y son administrados por un médico licencia.
2. La evaluación médica, pruebas de sangre
3. 1 inyección intravenosa de células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo, con Vit. C, Los eicosanoides y aminoácidos (día 1)
4. Cámara Hiperbárica (día 2)
5. 1 inyección intravenosa de células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo, con Vit. C, Los eicosanoides y aminoácidos (día 3)
6. Cámara Hiperbárica (día 4)
7. 1 inyección intravenosa de células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo, con Vit. C, Los eicosanoides y aminoácidos (día 5)

Terapia Celular para la Diabetes Mellitus

Ejemplo de transgénico en Diabetes Mellitus

La insulina y las bacterias transgénicas

Antes a los diabéticos se les administraba insulina de cerdos y vacas, la cual era muy parecida a la humana, pero algunos de sus componentes eran ligeramente diferentes y llevaban a algunos diabéticos a considerarlas extrañas.

La producción de insulina humana se consiguió gracias a la ingeniería genética. Los pasos para conseguir fueron:

1. Se aisló y se cortó el gen productor de la insulina humana del resto de ADN humano.
2. Se insertó dicho gen en la bacteria E. coli
3. Se potenció la multiplicación de las E. coli transgénicas que producían insulina en cultivos bacterianos para obtener un gran número.
4. De esta población se extrae la insulina producida.

Transgénicos que salvan vidas

Recombinación de ácidos nucléicos en la naturaleza y ADN recombinante en Diabetes Mellitus

Recombinación de ácidos nucléicos en la naturaleza 

Un ejemplo de esto es la integración de ADN bacteriófago en el cromosoma de la bacteria Escherichia coli. El ADN mencionado es una molécula lineal en el fago normal; entonces, primero forma un círculo y luego se escinde por la enzima integrasa en el sitio de unión del fago. Un sitio similar en el cromosoma bacteriano se corta por la integrasa y posteriormente el ADN del bacteriófago es integrado en el cromosoma de la bacteria Escherichia coli. Nucleic acid

ADN recombinante en Diabetes

Por medio del ADN recombinanre nos permite obtener fragmentos de ADN en cantidades ilimitadas, que llevará además el gen o los genes que se desee. Este ADN puede incorporarse a las células de otros organismos en los que se podrá "expresar" la información de dichos genes. 
Es un tipo de ADN formado por la unión de dos moléculas de diferente origen. Se distingue entre el ADN recombinante natural, y el ADN recombinante sintético. El primero es el que se genera de manera biológica dentro de los organismos. El ADN se recombina de manera natural mediante procesos como la reproducción sexual, la transformación bacteriana y la infección viral
Este ADN puede incorporarse a las células de otros organismos en los que se podrá "expresar" la información de dichos genes.
Es decir que "cortamos" un gen humano y se lo "pegamos" al ADN de una bacteria; si por ejemplo es el gen que regula la fabricación de insulina, lo que haríamos al ponérselo a una bacteria es "obligar" a ésta a que fabrique la insulina. Recombinant DNA: Example Using Insulin

Microarray en Diabetes Mellitus

Los estudios con microarrays permiten estudiar a una escala genómica la diabetes tipo 2 en los diferentes modelos experimentales. En este trabajo usando una metodología de análisis de networks (redes) se han identificado 2 conjuntos de genes asociados con la señalización de la insulina y un network de receptores nucleares que están alterados en muchos modelos de diabetes y en diversos tipos de tejidos. En este trabajo también se ha identificado un network de interacciones entre las proteínas de ambos conjuntos que permite dibujar las vías de señalización entre ellos y sus relaciones funcionales. En este trabajo la integración de datos de microarrays con datos de networks de interaccción entre proteínas ha permitido descubrir nuevos procesos biológicos importantes en el desarrollo de enfermedades complejas como la diabetes tipo 2.
GENE EXPRESSION ANALYSIS FOR TYPE-2 DIABETES MELLITUS – A STUDY ON DIABETES WITH AND WITHOUT PARENTAL HISTORY

Esquema de un network (red) de interacción entre proteínas.

Análisis de PCR en Diabetes Mellitus

Tema:  Variantes genotípicas del SNP -19 del gen de la CAPN 10 y su relación con la diabetes mellitus tipo 2 en una población de Ciudad Juárez, México.

Objetivo: Analizar la relación del polimorfismo SNP-19 del gen CAPN10 con el desarrollo de DM tipo 2 en población de Ciudad Juárezy contribuir a la identificación de posibles marcadores de susceptibilidad en población mexicana mestiza.

Tipo de muestra: Sangre en ayuno

Extracción.- ADN genómico de linfocitos

1. Lisis Separación  y Purificación: Según el método de Miller modificado, utilizando un kit de reactivos (Puregene Blood Kit de Gentra System).
2. Gen amplificador: CAPN 10

Tipo de PCR.-

1. Desnaturalización:  94 ºC por 30 segundos
2. Hibridación:  60 ºC por 30 segundos                                  35 ciclos 
3. Extensión:  72 ºC por 30 segundos

Visualización: Electroforesis (EFO)

Variantes genotípicas del SNP -19 del gen de la CAPN 10 y su relación con la diabetes mellitus tipo 2 en una población de Ciudad Juárez, México

Identificación de genotipos del SNP-19 del gen CAPN10. Genotipos del polimorfismo SNP-19 del gen CAPN10: Homocigoto 3r/3r, banda de 187pb, heterocigoto 3r/2r una banda de 187 y otra de 155 pb, homocigoto 2r una banda de 155 pb.

Prueba de tamizaje y confirmatoria

Prueba de tamizaje:
La glucemia en ayunas es la prueba más sencilla  para el tamizaje oportunístico de Diabetes Mellitus en personas asintomáticas. Sin embargo, la prueba de oro para el  tamizaje de diabetes en estudios sigue siendo la medición de la glucemia 2 horas post  carga de glucosa(PTGO). Es muy importante  tener en cuenta que una prueba de tamizaje solo  indica una alta probabilidad de tener DM y debe ser confirmada con una prueba diagnóstica.

Confirmatoria:
El diagnóstico de diabetes se confirma mediante determinación de glucosa en sangre, que se realizan ante situaciones de sospecha clínica o bien en estudios  de detección sistemática (diagnóstico de diabetes gestacional y estudios epidemiológicos); otro método confirmatorio para la diabetes es el diagnóstico la hemoglobina glicosilada (Hba1c), la cual es una heteroproteína de la sangre que resulta de la unión de la Hb con carbohidratos libres.
¿Cómo se diagnostica la DM?
Sobre la diabetes